ROCK1和ROCK2同工型已被用作Life Chemicals使用Schrödinger软件进行虚拟筛选的靶点，该软件也用于蛋白质分子构象的制备。两种ROCK激酶结构（PDB ID：2ESM和4L6Q）均通过蛋白质准备工具进行了优化。同时，使用LigPrep模块处理了来自ChEMBL的多个IC50低于1.5 µM的已知ROCK1和ROCK2抑制剂，以生成不同pH状态（Epik）的3D构象。随后，所有对接程序均使用Glide进行（图1）。在对接阶段定义并应用了多个氢键约束和疏水区域。根据对接得分值，从Life Chemicals库存集合中筛选出的对接化合物根据从ChEMBL测试化合物对接获得的得分值范围进行了进一步筛选。